vse-zabolevaniya.ru
ГлавнаяМикробиологияГоспитальные инфекции

Госпитальные инфекции

ссылки Заболевание микробной этиологии, возникающие у госпитализированных больных во время пребывания в стационарах или в медицинских работников во время работы в них, называются нозокомиальными или внутрибольничными (госпитальными) инфекциями.Встречаются они во всех странах мира и является серьезной проблемой для лечебно-профилактических учреждений здравоохранения. Они, как правило, присоединяются к основному заболеванию или впервые возникают у новорожденныхРазличают следующие основные группы нозокомиальных инфекций: бактериемии и септицемии, гнойно-воспалительные осложнения ран и ожогов, острые кишечные, респираторные, урогенитальные, посттрансфузионные инфекции и заболевания, обусловленные длительным лечением антибиотиками.Возбудителями этих заболеваний могут быть самые разные виды бактерий, вирусов, грибов и простейших. Однако ведущая роль принадлежит представителям кокковой группы, бактероиды, клостридии и многочисленным грамнегатавним палочкам Удельный вес грамотрицательных бактерий в возникновении госпитальных инфекций из года в год растет.

Микробиологическая диагностика

Микробиологическая диагностика внутрибольничных инфекций имеет свои особенности и трудности В связи с большим разнообразием возбудителей нужно применять различные методы исследования При бактериологической диагностике гнойно-воспалительных заболеваний часто выделяют микробные ассоциации (стафилококки и грамотрицательные бактерии, несколько видов энтеробактерий т.д.) Когда выделяют условно-патогенные микроорганизмы, важно определять их количество в исследуемом материале. Критическая концентрация составляет 105-106 клеток в 1 мл. Но количество микробов в исследуемом материале может очень различаться. Поэтому важно проводить и видовое идентификацию бактерий и определять их потенциальные патогенные свойства. Необходимо также ставить соответствующие серологические реакции для выявления специфических антигенов в крови больного, определять антитела (особенно нарастания их титра) до автоштамив, и тем самым обоснованно утверждать диагноз.Ниже приведены основные методические приемы микробиологической диагностики отдельных госпитальных инфекций, которые часто встречаются в больничных учреждениях.

Бактериемии и септицемии

Бактериемии и септицемии, как одни из тяжелых форм назокомиальних инфекций, могут вызвать практически почти все виды патогенных микроорганизмов. Грамположительные бактериемии зачастую вызывают золотистые и эпидермальные стафилококки и стрептококки, а грамотрицательные бактериемии - эшерихии, клебсиеллы, псевдомонады, протей, серации, нейссерии. Возбудителями септицемий зачастую являются бактероиды и клостридии.Точный диагноз этих форм нозокомиальных инфекций можно установить только после выделения гемокультуры. Дня проведения микробиологического анализа берут только венозную кровь (по возможности до приема или через 12-24 ч после последнего приема антибактериальных препаратов). При этом необходимо соблюдать, жестких правил асептики В месте венепункции кожу обрабатывают 70% спиртом, затем одним из антисептиков (йодоформ, хлоргексидин) и снова спиртом. Обработанная поверхность должна высохнуть и только через 1-2 мин берут 10-20 мл крови (у детей 3-5 мл). Посевы производят в 2 флакона (по 5-10 мл) с обогащенными питательными средами в соотношении 1:10 и быстро отправляют в лабораторию, не допуская замораживания Один флакон инкубируют в обычных аэробных условиях, второй - заливают вазелиновым маслом, чтобы обеспечить рост анаэробов Для выделения аэробных бактерий используют "двойное среда" (скошенный агар и сахарный бульон в одном флаконе: посев крови проводят в бульон и при инкубации периодически орошают им скошенную часть агара, на котором потом вырастают изолированные колонии). Для анаэробных бактерий используют тиогликолевой бульон и среду Китга-Тароцци, для грибов - жидкая среда Сабуро.Микроскопическое исследование крови обычно не проводят, поскольку обнаружить бактерии в мазках удается очень редко.Засеяны среды во флаконах выдерживают в термостате при 37 ° С в течение 7 дней, контролируя наличие роста макро-и микроскопически каждый день, делают высев на соответствующие плотные среды с целью выделения и идентификации чистых культур, изучение их биологических свойств и чувствительности к антибиотикам. При отсутствии роста в течение недели проводят повторное исследование на 14-ый день. Если роста нет течение двух недель, результат считают отрицательным. При выделении бактероидов исследование может длиться три и более недель.Для повышения частоты выявления бактерий рекомендуют брать кровь для выделения гемокультуры трижды в течение суток.

Заболевания дыхательных путей

Заболевания дыхательных путей (риниты, фарингиты, бронхиты, пневмонии, абсцессы и гангрены легких и др.). Вызывают палочка инфлюэнцы, пневмококки, микоплазмы, пневмоцисты, а также орто-и парамиксовирусы, рино-и коронавирусы, адено-и респираторно-синцитиальный вирус. Внутрибольничные инфекции дыхательных путей (особенно пневмонии) доминируют среди всех других заболеваний.Основным материалом для исследования мазки из носа, рото-и носоглотки, мокрота и промывные воды бронхов. Сравнительно редко исследуют биоптаты легких, аспирантов трахеи. Мазки берут тампонами натощак до чистки зубов, полоскание рта, носа и глотки. Синтетический гигроскопическую вату для изготовления тампонов использовать не следует, поскольку она содержит альгинат натрия, который пагубно влияет на микрофлору. Для каждой ноздри берут отдельный тампон. При заборе материала из ротоглотки нельзя касаться тампоном к слизистой рта и языка. Материал из носоглотки берут специальным задньоглотковим тампоном.Утреннюю порцию мокроты собирают в стерильную банку. Перед этим больной чистит зубы и прополаскивают рот кипяченой водой для удаления остатков пищи, эпителиальных клеток и микрофлоры ротовой полости.Исследуемый материал сначала микроскопируют в мазках, окрашенных по Граму, и одновременно проводят посев. Микроскопия является важным ориентиром для выбора оптимальных питательных сред.При просмотре мазков оценивают общую картину микрофлоры наличие стафило-, микро-и стрептококков, нейссерий, капсульных пневмококков и клебсиелл, грамотрицательных палочек, мицелия и бластоспор грибов При острой инфекции в мокроте обнаруживают бактерии, расположенные вблизи лейкоцитов. Микроорганизмы из ротовой полости располагаются вокруг эпителиальных клеток, их во внимание не принимают Скорее всего они свидетельствуют о нарушениях техники забора В таких случаях взятие материала необходимо повторить.Посевы проводят на кровяное и шоколадный агар, ЖСА, среды Эндо и Сабуро, предварительно подогревают в термостате. При посеве тампоном материал сначала втирают в среду на небольшом участке (2-3 см2), а затем штрихами по всей поверхности среды,Перед посевом мокроты сначала выливают в чашку Петри, выбирают 2-3 гнойные комочки, трижды отмывают их от сопутствующей микрофлоры в стерильномизотоническом растворе хлорида натрия и наносят на среду. Посев проводят стерильным стеклянным шпателем, равномерно растирая материал по поверхности среды. Через 18-24 ч инкубации в термостате подсчитывают количество колоний, выделяют чистые культуры и проводят их идентификацию общепринятыми методами. Обязательно определяют их чувствительность к антибактериальным препаратамКак дополнительный используют и количественный метод определения бактерий в мокроте. Для этого 1 мл мокроты гомогенизируют в 9 мл бульона или пептонной воды с помощью стеклянных бусинок в колбе в течение 20 мин, или в ступках со стерильным кварцевым песком. Затем с гомогенизированный материала готовят серийные разведения от 10 и до и Оь7 и по 0,1 мл из последних трех разведений высевают на кровяной агар. На среде Эндо и Сабуро сеют 0,1 мл исходного разведения (1:10) Через 24 ч инкубации в термостате подсчитывают количество колоний каждого вида микроорганизмов. Диагностически значимым является выявление S.pneumoniae и H.influenzae в концентрации 106 и более бактерий в 1 мл. Для условно-патогенных микроорганизмов такая концентрация имеет значение при 2-3-кратном их обнаружении с интервалом в 3-5 дней.Важное значение имеет количественная оценка колоний при первичном посеве на плотные среды. При этом используются следующие критерии (степени): первый - рост единичных колоний (до 10), второй - рост от 10 до 25 колоний, третий - рост 50 и более колоний четвертый - сплошной рост, колонии нельзя подсчитать.Третяя-четвертая степень, как правило, свидетельствует об этиологической роли данного микроорганизма, первый и второй - о носительстве или контаминацию.При подозрении на вирусные инфекции дыхательных путей исследуемый материал направляют в вирусологической лаборатории, где проводят соответствующие вирусологические исследования.

Гнойно-воспалительные раневые и ожоговые инфекции

Возбудителями раневых и гнойных послеоперационных осложнений является стафило-и стрептококки, грамотрицательные бактерии, клостридии, бактероиды, фузобактерии и др.. Остеомиелиты, маститы, омфалита, отиты часто вызывают золотистый и эпидермальный стафилококки, аппендицит и перитонит - эшерихии, протей, бактероиды, энтерококки, клебсиеллы, часто в ассоциациях со стафилококками. Ожоговые инфекции вызывают стафилококки, псевдомонады и другие грамотрицательные бактерии, представители нормальной микрофлоры кожи и слизистых оболочек.Материал из раны или поверхности ожогов берут двумя стерильными тампонами (один - для изготовления мазков, второй - для посева). Навоз, кусочки удаленных тканей, промывочную жидкость из дренажей забирают в стерильные пробирки при соблюдении правил асептики и в течение часа доставляют в лабораторию. При поражении наружного уха проводят сначала обработку кожи 70% спиртом, затем берут материал стерильным ватным тампоном. Если воспалительный процесс локализуется в среднем или внутреннем ухе, исследуют пунктат и материал, взятый во время операций. Материал из конъюнктивы, роговицы и век принимают бактериологической петлей (или маленьким тампоном). Забор материала проводит • врач-окулист.Изготовленные для микроскопии мазки окрашивают по Граму (в случае необходимости по Романовскому-Гимзе или Цилю-Нильсену). При обнаружении микроорганизмов описывают их морфологическую характеристику и плотность обсемененности По результатам микроскопии выбирают питательные среды и вносят коррективы в ход микробиологического исследования.Посевы материала делают на 5% кровяной агар, сахарный бульон и среда для контроля стерильности. Посев на плотные среды проводят по методу "тампон-петля". Сначала тампоном проводят дорожку по диаметру чашки, затем другой стороной тампона засевают еще одну "дорожку" параллельную первой. После этого материал рассеивают петлей штрихами, перпендикулярными к "дорожек". Такой посев дает возможность выделить бактерии в виде отдельных колоний даже с микробных ассоциаций.Посевы на плотные и в жидкие среды инкубируют при 37 ° С в течение суток. При обнаружении роста отдельные колонии отсеивают на элективные среды с целью их идентификации. Обязательно отмечают или микробы растут в виде монокультуры или в ассоциации. При наличии ассоциаций отмечают преимущественный рост того или иного представителя ассоциации. В ряде случаев рекомендуют проводить и количественные исследования, определяя концентрацию микробов в 1 мл гноя, экссудата или 1 г удаленной ткани.При подозрении на наличие в исследуемом материале грибов, занял дополнительно проводят еще и на среду Сабуро и выращивание осуществляют при температуре 22-25 ° С в течение 5 суток. При подозрении на выделение нейссерий посевы проводят на сывороточный агар и тиогликолевой бульон. Инкубацию проводят при 37 ° С в эксикаторе при 5-10% С02.Выделенные чистые культуры идентифицируют по морфологическим, культуральным, биохимическим и антигенным их свойствами, как это описано в соответствующих разделах специальной микробиологии.

Урогенитальные инфекции

Цистит, уретрит, пиелонефрит, уросепсис и др.. могут вызвать стафило-и стрептококки, протей, эшерихии, псевдомонады, клебсиеллы, микоплазмы. При бактериологическом исследовании важно правильно взять пробу, провести качественное и количественное определение микроорганизмов в 1 мл мочи еще до начала антимикробной терапии.Непосредственно перед забором мочи необходимо обмыть с мылом наружные половые органы. В стерильную посуду берут 3-5 мл средней порции мочи и посев у постели больного или доставляют в лабораторию в течение 30 мин. В случае невозможного немедленного исследования мочу хранят в холодильнике не более 24 часов.Для посева мочи у постели больного рекомендуют метод "предметного стекла". Стерильное предметное стекло покрывают слоем расплавленного агара и после застывания среды погружают в стаканчик с мочой, вынимают, дают мочи стечь, инкубируют стекло в чашке Петри 18-24 ч при 37 ° С. Изолированные колонии идентифицируют.С целью количественного микробиологического исследования мочи чаще всего используют метод калиброванной петли, которой проводят секторные посевы.Платиновой петлей, диаметром 2 мм (емкость 0,005 мл), проводят посев мочи (30-40 штрихов) на агар в секторе А. Петлю стерилизуют в пламени горелки и проводят ею 4 штриховых посевы из сектора А в сектор 1, из сектора 1 в сектор 2, из сектора 2 в сектор 3. Чашки инкубируют в течение суток при 37 ° С, после чего подсчитывают количество колоний, выросших в разных секторах. Степень бактериурии определяют по методу Гоулда.Метод секторных посевов позволяет не только определять степень бактериурии, но и выделять возбудителя в чистой культуре.В 1 мл мочи здорового человека содержится не более 104 бактерий (критическое число 105 микробов) При обнаружении 106-108 и более бактерий в 1 мл мочи наличие инфицирования мочевыводящих путей считают несомненным.Д ля определения локализации инфекционного процесса в почках или мочевом пузыре проводят катетеризацию последнего. С помощью катетера выпускают всю мочу и промывают мочевой пузырь раствором антибиотика (неомицин), затем трижды с интервалом 10 мин берут пробы мочи для бактериологического исследования. Если инфекционный процесс затрагивает почки, во всех трех пробах мочи будут находиться бактерии, количество которых возрастает в каждой следующей порции. При инфекции только мочевого пузыря моча остается стерильной.Гнойно-воспалительные процессы женских половых органов (уретрит, вульвовагинит, цервицит, эндометрит, бартолинит и др.). Могут вызывать как облигатныеанаэробы (бактероиды, пептострептококки, трепонемы, клостридии, гарднереллы), так и факультативные анаэробы (энтерококки, стафилококки, эшерихии, клебсиеллы, протей, псевдомонады, грибы кандида и др..).Основой микробиологической диагностики этих заболеваний является выделение и идентификация микроорганизмов и установление их этиологической роли. Бактериологические исследования микрофлоры женских половых органов имеют определенные трудности, поскольку она часто меняется в разные периоды жизни женщины. Только полость и придатки матки в норме стерильны.Взятие материала для исследования проводит акушер-гинеколог. Образцы материала из уретры берут утром до мочеиспускания бактериологической петлей или ложечкой Фолькмана. С вульвы, влагалища и шейки матки материал забирают ватным тампоном к проведению мануального исследования. Для взятия материала из полости матки используют устройства, которые могут раскрываться и закрываться на определенной глубине (напр. шприц-аспиратор). При воспалении придатков матки материал берут с помощью пункции или при оперативном вмешательстве. Следует помнить, что большинство возбудителей быстро погибает во внешней среде. В этой! Связи посевы необходимо проводить немедленно или вносить пробы в тиоптиколеве или глицериновое среду.Одновременно с взятием материала для посева готовят отдельными тампонами 2-3 мазки для микроскопии, осторожно распределяя материал на стерильных стеклах мягкими движениями, не употребляя грубого втирания, высушивают при комнатной температуре. Мазки направляют в лабораторию в чашках Петри или покрывают чистыми предметными стеклами. При такой технике изготовления мазков хранится настоящий распределение и количественное соотношение компонентов исследуемого материала, дает возможность выявлять внутриклеточное расположение бактерий (нейссерии).Мазки окрашивают по Граму и микроскопируют под иммерсионным объективом. Отмечают количество эпителиальных клеток, лейкоцитов, характер микрофлоры и определяют степени чистоты влагалищного секрета. Обнаружение в мазках трихомонад, микоплазм, уреаплазм, мицелия или бластоспор грибов имеет важное диагностическое значение.Для выделения факультативных анаэробов посевы проводят тампоном с помощью штрихового метода на кровяной агар и среду Эндо, затем сеют тем же тампоном в сахарный бульон. При подозрении на наличие анаэробов посевы проводят в тиогликолевой бульон и среду Китт-Тароцци. В случае обнаружения мицелия или бластоспор грибов, посевы делают на агар Сабуро. При исследовании кусочков тканей их вначале растирают в ступке с песком, добавляют бульон или 0,85% раствор хлорида натрия. По 0,1 мл гомогената засевают на плотные среды, а также в сахарный бульон.Посевы выращивают в термостате при 37 ° С (на агаре Сабуро при 22-25 ° С), ежедневно проверяя наличие роста. Подсчитывают количество различных видов колоний и их соотношение. При помутнении бульона делают мазки и по результатам микроскопии делают высев на плотные среды (кровяной агар, Эндо,ЖСА) Затем выделяют чистые культуры, идентифицируют их и определяют чувствительность к антибиотикам.При исследовании материала из участков, где в норме вегетуе своя микрофлора, важное значение имеет количественная оценка различных видов бактерий при первичном посеве. При этом используются следующие критерии (степени):I - очень слабый рост - рост только в жидких средах, на плотных средах роста нет.II - слабый рост - на плотной агаре рост до 10 колоний.III - умеренный рост - на плотной агаре рост более 100 колоний.IV - очень густой (сплошной) рост.Первый и второй степени роста указывают чаще на постороннее загрязнение, третий и четвертый - на этиологическую роль данного микроорганизма.Отрицательный результат исследования выдают при отсутствии роста на всех средах в течение 72 ч (на агаре Сабуро - в течение 5 суток).

Острые кишечные инфекции

Возбудителями пищевых интоксикаций есть энтеротоксигенные стафилококки, палочки ботулизма и другие виды клостридий. Пищевые токсикоинфекции способны вызвать многочисленные виды энтеробактерий, псевдомонад, вибрионов, бацилл, кампилобактерии и др.. Особенно часто возникающие внутрибольничные случаи сальмонеллезов. Кроме того, они могут вызвать ротавирусы и криптоспоридии.Для выявления возбудителей заболеваний в различных участках кишечного тракта используют преимущественно бактериологический метод исследования. При поражении желудка оптимальным считают забор биоптатов при фиброгастроскопии. Взятые пробы помещают в стерильный изотонический раствор и направляют в лабораторию. Но чаще всего в качестве исследуемого материала для диагностики кишечных инфекций забирают фекалии, рвотные массы и промывные воды желудка.Бактериологическое исследование необходимо начинать не позднее 0,5-1 часов после взятия материала. Если это невозможно, пробы следует заморозить и исследовать не позднее 24 час. Иногда для транспортировки целесообразно употреблять консервирующие жидкости (30% глицерин, селенитовый бульон и т.д.). Промывные воды необходимо исследовать немедленно. При большом количестве их лучше процентрифугуваты и исследовать осадок. Желчь берут с помощью зондирования отдельными порциями (А, В, С) в три стерильные пробирки. Взятые пробы направляют в лабораторию не позднее 1-2 часов. Материал из тонкой кишки отбирают с помощью фибродуоденоскопии или специальным зондом, который открывается и закрывается в заданном месте. Микроорганизмы толстой кишки изучают при исследовании фекалий. Мазок из прямой кишки берут тампоном или трубкой Цимана. При поражении нижних отделов толстого кишечника можно взять материал непосредственно с места поражения с помощью ректороманоскопа, но этот метод в последнее время используют редко. Чаще для этого используют фиброколоноскопия.Посевы исследуемого материала проводят на плотные и жидкие элективные среды, выделяют чистые культуры, определяют их чувствительность к антибиотикам.При оценке результатов бактериологического исследования необходимо обращать внимание не только на видовой состав микробиоценоза кишечника у данного больного, но и количественное соотношение отдельных его сочленов.Если из испражнений выделяют патогенные энтеробактерии, гемолитические эшерихии и гемолитические стафилококки, которые у здоровых людей отсутствуют, это имеет важное диагностическое значение. Для признания этиологической роли представителей нормального микробиоценоза важно сравнивать их титр с концентрацией соответствующих микроорганизмов у здоровых детей и взрослых. При поражениях, вызванных другими видами, необходимо проводить исследования в соответствии с методикой выделения каждого возбудителя.

Инфекционисты в Москве

Рязанцева Марина Александровна 27 отзывов Записаться

Цена: 1700 руб.
Специализации: Гепатология, Инфекционные болезни.

Федосюк Александр Васильевич 58 отзывов Записаться

Цена: 1500 руб. 1350 руб.
Специализации: Гастроэнтерология, Гепатология, Инфекционные болезни.

Мыльцев Андрей Анатольевич 182 отзыва Записаться

Цена: 3500 руб. 2275 руб.
Специализации: Аллергология, Иммунология, Инфекционные болезни.

Инфекционисты в Москве

мы с Вами свяжемся и согласуем время