Иммунофлюоресцентный анализ, или реакция иммунофлюоресценции (РИФ), также основан на взаимодействии антигенов с антителами, но реагент при этом помечен красителем, светящимся в ультрафиолетовых лучах. Светящиеся комплексы антиген-антитело хорошо видны при флюоресцентной микроскопии.
Анализ проводят тремя способами.
Прямая реакция иммунофлюоресценции
Анализ предназначен для определения антигенов. К исследуемому материалу добавляют люминесцентные сыворотки, содержащие меченые антитела. Образовавшиеся иммунные комплексы выявляют с помощью флюоресцентного микроскопа.
Непрямая реакция иммунофлюоресценции
Анализ проводят для выявления антител к определенному антигену. Реагентом является немеченый антиген, который связывается с антителами, содержащимися в исследуемом материале. Затем добавляют реагент с мечеными антиантителами, т. е. антииммуноглобулинами. Иммунные комплексы взаимодействуют с ними и светятся при микроскопии.
Конкурентная реакция иммунофлюоресценции
Анализ назначают для выявления антигенов. Реагентом являются антитела, к которым добавляют исследуемый материал с антигенами и дополнительный реагент (стандартные меченые антигены). Меченые антигены вступают в реакцию с антителами в первую очередь, конкурируя, таким образом, с немечеными антигенами. Образовавшиеся иммунные комплексы светятся при микроскопии, причем по их количеству можно определить содержание антигена в исследуемом материале.