Пневмококковые инфекции

Среди болезнетворных стрептококков S.pneumoniae (пневмококк) занимает особое место. Он играет очень важную роль в инфекционной патологии человека. Этот вид является одним из основных возбудителей крупозного воспаления легких. По далеко неполным данным ежегодно в мире насчитывается более 500 тыс. зипадкив пневмоний, вызванных пневмококками, особенно часто у детей и пожилых людей. Кроме воспаления легких этот микроб вызывает менингит, эндокардит, перитонит, отит, ринит, гайморит, сепсис, ползучую язву роговицы и ряд других заболеваний. Для проведения лабораторной диагностики используют бактериоскопический, бактериологический и биологический методы. Материалом для исследования мокроты, гной, кровь, спинномозговая жидкость, слизь из рото-и носоглотки, выделения из гайморовой пазухи, глаза и уши. Важно немедленно отправлять материал в лабораторию и исследовать очень быстро, поскольку пневмококки подвержены автолиза.

Бактериоскопическое исследование

Бактериоскопическое исследование материала (кроме крови) сводится к изготовлению двух мазков. Один из них окрашивают по Граму, второй - за Бурри-Гинс, что позволяет выявить капсулу. Пневмококки располагаются в виде ланцетовидными диплококков, окруженных общей капсулой. Если в поле зрения выявляют 10 и более типичных диплококков, можно с большой вероятностью сделать вывод о наличии S.pneumoniae. Однако, первичная микроскопия не дает права поставить окончательный диагноз, поскольку в мазках могут быть капсульные непатогенные диплококки - представители нормальной микрофлоры. Поэтому нужно проводить посев клинического материала и выделять чистую культуру.

Бактериологическое исследование

При сепсисе у постели больного сеют 10 мл крови во флакон, содержащий 100 мл сывороточного или сахарного бульона, инкубируют 18-20 ч при 37 ° С, затем высевают на кровяной агар, выделяют и идентифицируют чистую культуру. При менингите ликвор центрифугируют и из осадка делают посев на кровяной агар. На нем пневмококки растут в виде маленьких круглых колоний, окруженных зеленой зоной, в центре колонии видно характерное вдавление. Посев мокроты или гноя на питательные среды делать нецелесообразно, поскольку присутствует сапрофитная микрофлора подавляет рост S.pneumoniae. Лучше исследуемый материал ввести в брюшную полость белых мышей. Постановка биопробы - быстрый, надежный и точный метод выделения чистой культуры пневмококков. Белые мыши очень чувствительны к этим бактериям и уже через 10-12 ч после заражения пневмококки проникают в кровь и паренхиматозные органы, вызывая сепсис. Посев крови из сердца или кусочков внутренних органов во время вскрытия животных позволяет выделить чистую культуру возбудителя. Для идентификации пневмококков используют такие их свойства. В отличие от других видов стрептококков, S.pneumoniae не растет на среде с оптохином, ферментируется инулин и очень чувствителен к действию желчи (дезоксихолатна проба). Быстрый лизис пневмококков под действием желчи можно обнаружить, если к 1 мл бульонной культуры добавить 0,5 мл желчи. Через 15-20 мин пребывания в термостате наступает полный лизис бактериальных клеток. Для определения сероваров пневмококков (сейчас их насчитывается 85) используют реакцию агглютинации на стекле с типовыми сыворотками или феномен "набухания капсул". В присутствии гомологичной сыворотки капсула пневмококков сильно отекает. Еще лучше проводить серотипирования с помощью коммерческих реагентов в реакциях латекс-агглютинации или коаглютинации, благодаря которым проявляют капсульные антигены. Среди стрептококков важен еще род Enterococcus, наиболее значимыми видами которого E.faecalis, E.faecium и E.durans. Они довольно широко распространены в природе. Основной их экологической нишей является кишечник человека и животных, но их обнаруживают и в составе нормальной микрофлоры кожи промежности, мочеполовых органов, рото-и носоглотки. Они могут вызвать нагноение ран, бактериемии, поражения урогенитальной системы, особенно у больных с длительно функционирующими катетерами, пищевые токсикоинфекции, дисбактериозы кишечного тракта, реже эндокардиты. В мазках из исследуемого материала энтерококки располагаются парами, короткими цепочками или в виде скоплений, грамположительные. Бактериологическая диагностика энтерококковых инфекций проводится без каких-либо трудностей, поскольку эти бактерии хорошо растут на простых средах. Селективным для них агар диф-3 (до 600 мл 3% МПА добавляют 400 мл 40% желчи). Через 24 ч инкубации колонии, выросшие имеют размеры 0,4-1,0 мм сероватого цвета. На кровяном агаре вокруг колоний возникает неполный или полный гемолиз. В отличие от зеленящих стрептококков энтерококки могут расти на МПА с 6,5% NaCl, редуцирующих молоко с метиленовым синим при 37 ° С через 4-6 часов. Идентификацию выделенных культур проводят по морфологическим, культуральным и биохимическим признакам.