vse-zabolevaniya.ru Подберем лучшего врача в Москве
звоните: 7 (499) 116-78-36
ГлавнаяМикробиологияКлостридии столбняка и столбняк

Клостридии столбняка и столбняк

ссылки

Клостридии столбняка

Возбудитель столбняка С. tetani впервые обнаружен А. Нико-лайером в 1884 г. и выделен в чистой культуре С. Китазато в 1889 г.

Морфология и физиология

Клетки С. tetani - крупные прямые, перитрихи, капсулу не образуют. Споры круглые, больше диаметра клетки, расположены терминально. Углеводы не ферментируют, не образуют индола, восстанавливают нитраты, медленно свертывают молоко. Культивируются на среде Китта-Тароцци, сахарном кровяном агаре. Колонии окружены зоной гемолиза.

Хемоорганотрофы

С. tetani не образуют каталазу и оксидазу, ферментируют глюкозу, лактозу и другие сахара, не образуют индола, восстанавливают нитраты, разжижают желатину.

Антигены

. Содержат видоспецифический О-антиген и типоспецифические Н-антигены, по которым выделяют около 10 сероваров. Антигенная специфичность столбнячного экзотоксина стабильна.

Патогенность и патогенез

Патогенность С. tetani определяется секрецией сильнодействующих двух белковых токсинов. Тетаноспазмин представляет собой белок, непрочно связанный с клеткой. В питательной среде появляется в результате их аутолиза. Тетаноспазмин - функциональный блокатор, способный соединяться с рецепторами нейронов. Его токсичность объясняется прямым влиянием на процесс передачи нервных импульсов в головном и спинном мозге. Тетанолизин - секретируемый белок, антигенно сходный с Острептолизином и тета-токсином С. perfnngens. Он относится к мембранотоксинам, вызывает гемолиз эритроцитов. Заболевание начинается после прорастания в ране спор возбудителя и продуцирования вегетативными клетками описанных токсинов, которые гематогенным путем разносятся по организму. У человека столбняк протекает по нисходящему типу. Независимо от места проникновения возбудителя в организм первыми симптомами являются тонические сокращения жевательных и мимических мышц, затем тоническое сокращение и спазм мышц затылка и спины. Тело принимает вид дуги. Смерть наступает от асфиксии и поражения жизненно важных нервных центров. Столбняк может наступить после родов, у новорожденных и после операций. У новорожденных столбняк возникает вследствие плохой обработки антисептиками пупочного канатика, у рожениц - при попадании спор через слизистую оболочку матки.

Иммунитет

После перенесения столбняка иммунитет отсутствует, хотя тетаноспазмин обладает выраженной иммуногенной активностью. Это связано с недостаточным его количеством вследствие быстрого проникновения в нейроны. Возможны повторные заболевания.

Экология и эпидемиология

Возбудитель столбняка широко распространен в природе. Средой обитания является кишечник животных и человека. С фекалиями он попадает в почву, в которой образуются споры, сохраняющиеся много лет. Заражение наступает только при проникновении спор в организм через раневую поверхность, особенно при создании в них анаэробных условий.

Столбняк

Столбняк (столбняк) - острая раневая инфекция человека и животных, развивающейся в результате поражения токсином нейромоторный клеток спинного и головного мозга, проявляется развитием тонических и тетанических сокращений мышц. Возбудитель - Clostridium tetani - тонкий, длинный, подвижный микроб с терминальной круглой спорой, которая придает ему вид барабанной палочки. Она имеет О-и Н-антигены, по характеру которых возбудитель столбняка разделяют на 10 серотипов, но все они выделяют одинаковый, тождественный токсин.Источником столбнячных клостридий являются животные (овцы, лошади, козы, коровы, свиньи), в кишечнике которых они постоянно находятся в составе нормальной микрофлоры. С фекалиями животных микробы попадают в почву, переходят в споров форму и сохраняются годами. Болезнь развивается лишь тогда, когда возбудитель проникает в организм через поврежденную кожу, мышцы, слизистую оболочку при ранениях, инъекциях, ожогах, обморожениях, пролежнях и т.п.. Микробиологические исследования с целью диагностики столбняка проводят редко. Клиническая картина болезни настолько характерна, что необходимость прибегать к бактериологической диагностики просто отпадает. Только в случаях нетипичного или летального ее течения, при развитии столбняка после подпольных абортов или родов в домашних условиях, а также когда возникает столбняк новорожденных, такие исследования необходимо рекомендовать. Значительно чаще проводят выявление С. tetani в шовных и перевязочных материалах, лекарственных препаратах для парентерального введения, в пробах почв тех регионов, где регистрируется высокая заболеваемость столбняк.

Взятие материала

От больных исследования берут гной, раневой содержание, экссудат, кусочки некротизированных тканей, тампоны из раны, инородные тела от умерших-кровь, раневой содержание, старые рубцы, селезенку. В случаях возникновения столбняка после абортов и родов исследуют выделения и биоптаты из влагалища и матки, при заболевании новорожденных - выделение из пупка. Все материалы немедленно направляют в бактериологической лаборатории лучше в специальных транспортных средах, защитив их от пагубного воздействия кислорода воздуха.

Первичная бактериоскопия

С патологического или секционного материалов изготавливают несколько мазков и препаратов-отпечатков. окрашивают по Граму, Ожешко (для выявления спор) и микроскопируют в иммерсионной системе. Наличие в мазках длинных грамположительных палочек с круглыми терминальными спорами при соответствующей клинической картине позволяет заподозрить присутствие С. tetani.Но на основании только микроскопического исследования можно сделать вывод, поскольку в материале могут быть сходны по морфологии непатогенные микроорганизмы (С. pseudotetanicum, С. tetanomorpham).

Бактериологическое и биологическое исследование

Полученный в лаборатории материал растирают в стерильных ступках с песком, добавляя среду для контроля стерильности до получения 10% суспензии. Жидкую фазу материала разделяют на две равные части, одну из которых прогревают при 80 ° С в течение 20 мин. Это приводит к гибели вегетативных клеток бактерий и значительно повышает шансы на выделение С. tetani. Далее греть и негритий материал исследуют параллельно.Для накопления анаэробных клостридий обе порции высевают в две пробирки со средой Китти-Тароцци (или тиогликолевой бульоном). Одновременно для получения изолированных колоний производят посев на чашку с анаэробным кровяным агаром следующего состава: к еритрит-агара добавляют 10% среды 199, 10 мкг / мл метадиону, 10 мкг / мл гемина, 10 мг / мл цистина, 0,1% твина - 80 и 5% дефибринированной крови барана или кролика. При сильном загрязнении проб посторонним микрофлорой до агара еще добавляют неомицин, гентамицин или налидиксовую кислоту в количестве 40-50 мкг / мл.Посевы анаэробных условиях при температуре 37 ° С в течение 48-72 час. Колонии С. tetani на кровяном агаре плоские, полупрозрачные, с неровными краями, нередко в виде переплетенных нитей, напоминающие паучков. Вокруг колоний возникает зона гемолиза. Если колонии отсутствуют, делают высев из среды накопления на кровяной агар. При посеве уколом в высокий столбик сахарного агара колонии С. tetani напоминают облака или жмуточкы ваты.Выделенная чистую культуру идентифицируют по морфологическим, культуральным признакам и обязательно путем определения токсигенности, которая является решающим тестом при диагностике столбняка. Для выявления токсического действия культуры или первичного изучаемого материала ставят биологическую пробу нейтрализации токсина столбнячной сывороткой на животных.Столбнячный токсин получают путем выращивания культуры в среде Китт-Тароцци течение 2-3 суток с последующей фильтрацией или центрифугированием бульона. Двум белым мышам внутримышечно (у корня хвоста) вводят по 0,5 мл смеси фильтрата с столбнячной антитоксической сывороткой (200 МЕ). Смесь предварительно выдерживают в термостате 40-60 мин. Наблюдение за мышами проводят в течение 4-5 суток. Если в фильтрате содержался столбнячный экзотоксин, зараженныемыши погибают при явлениях восходящего столбняка. Контрольные животные остаются живыми. Аналогично биопробу ставят и с исследуемым материалом (растертые в изотоническом растворе кусочки тканей, гной, экссудат и др.). Возникает такая же клиническая картина столбняка, как и после введения токсина, а Антисыворотка нейтрализует присутствует токсин.Для выявления столбнячного токсина в средах накопления, а также для идентификации выделенной чистой культуры С. tetani используют высокоспецифические и более экономическую реакцию непрямой гемагглютинации. В ряде лунок полистироловых пластины делают разведение культуральной жидкости в буферном растворе с кроличьими инактивированной сывороткой от 1:10 до 1:1280. Затем в каждую лунку вносят по 0,1 мл столбнячного эритроцитарного антительного диагностикума (суспензия эритроцитов барана, сенсибилизированных столбнячной антитоксической сывороткой). Пластины с лунками помещают в термостат на 60 мин, затем оставляют при комнатной температуре. Предварительный результат учитывают через 3 ч, окончательный - через 18 часа. При наличии столбнячного токсина в ряде лунок появляется феномен гемагглютинации.Для идентификации С. tetani в различных объектах можно использовать люминесцентно-серологический метод, применив противостолбнячную антимикробным сыворотку, меченую изотиоцианатом флуоресцеина, а также метод иммуноферментного анализа.Специально для выделения чистой культуры возбудителя столбняка Филдс предложил оригинальный способ: несколько капель прогретого при 60 ° С в течение 90 мин исследуемого материала или культуры с жидкой среды накопления сеют в конденсационную жидкость на дне пробирки со скошенным кровяным или сывороточным агаром. Посев выращивают 18-24 ч в условиях строгого анаэробиоза. Возбудитель столбняка благодаря своему ползучем роста, обусловленном жгутиками, растет в виде тоненькой пленки по всей поверхности среды. Из верхней части пленки делают 3-5 таких пересева до получения чистой культуры.Серологический метод диагностики столбняка практически не используется. Только для контроля эффективности вакцинации столбнячным анатоксином (определение уровня антитоксина в крови) выборочно проводят постановку реакции нейтрализации, РНГА, ИФА.

Профилактика и лечение

Вакцинопрофилактика столбняка проводится путем иммунизации взрослых и детей разными препаратами, в которые входит столбнячный анатоксин (АКДС, АДС - адсорбированная коклюшная вакцина и дифтерийно-столбнячные анатоксины). Для лечения применяется антитоксическая сыворотка и противостолбнячный иммуноглобулин.

Инфекционисты в Москве

Рязанцева Марина Александровна 27 отзывов Записаться

Цена: 1700 руб.
Специализации: Гепатология, Инфекционные болезни.

Федосюк Александр Васильевич 58 отзывов Записаться

Цена: 1500 руб. 1350 руб.
Специализации: Гастроэнтерология, Гепатология, Инфекционные болезни.

Мыльцев Андрей Анатольевич 182 отзыва Записаться

Цена: 3500 руб. 2275 руб.
Специализации: Аллергология, Иммунология, Инфекционные болезни.

Инфекционисты в Москве

мы с Вами свяжемся и согласуем время