Кампилобактер

Род Campylobacter (Campyla - изогнутые) относится к группе аэробных или микроаэрофильных подвижных спирально изогнутых грамотрицательных бактерий. Наибольшее значение в патологии человека имеет С. jejunii. Реже встречаются С. fetus и С. coli. Ранее отнесенный к данному роду С. pylori выделен в род Helicobacter.

Морфология и физиология

Тонкие вибриоидные клетки, имеющие один или более витков спирали. Споры не образуют. Подвижные, совершают характерное винтовое движение с помощью одиночных жгутиков, расположенных на одном или обоих частях клетки. Хемоорганотрофы не требовательны к питательному субстрату, не сбраживают углеводы. Для получения энергии используют аминокислоты, а не углеводы. Оксидазоположительные и уреазоотрицательные. Пигментов не образуют.

Антигены

Кампилобактеры содержат О-, К- и Н-антигены. В настоящее время выделено свыше 50 О-серогрупп кампилобактеров.

Патогеность и патогенез

К факторам вирулентности относят жгутики и муциназу, способствующие проникновению в слизистую оболочку тонкой кишки. Обладают умеренной пенетрационной активностью. Их токсичность связана с секрецией энтеротоксинов (функциональные блокаторы), нарушающими водно-солевой обмен через образование цАМФ, аналогично энтеротоксинам Е. coli и V. cholerae. При разрушении кампилобактеров освобождается эндотоксин. Описаны цитотоксины, вызывающие гибель чувствительных клеток. После колонизации участка тонкой кишки они могут проникнуть в кровяное русло, вызывая генерализованную инфекцию, чаще у иммунодефицитных лиц. В патогенезе кампилобактериозных энтеритов преобладают явления диареи или дизентериеподобных состояний. При этом С. jejunii и С. fetus вызывают энтериты у людей. С. jejunii встречается также при абортах овец. С.fetus чаще встречается у пожилых людей с иммунодефицитами, а также при некишечных формах кампилобактериоза, вызывая поражение паренхиматозных органов и даже сепсис.

Иммунитет

При кампилобактериозе наблюдается гуморальный иммунный ответ. Однако образующиеся антитела не обладают выраженными протективными свойствами. Экология и эпидемиология. Источником инфекции являются больные животные и люди, от которых кампилобактеры попадают в пищевые продукты (мясо, молоко) и воду. Передача инфекции происходит алиментарным путем. Возможен и контактно-бытовой путь. В окружающей среде при 4°-10°С сохраняются около недели. Зарегистрированы пищевые, молочные и водные вспышки кампи-лобактериоза, чаще у детей.

Хеликобактер

Род Helicobacter ранее относился к роду Кампилобактер, однако в настоящее время выделен в самостоятельный род.

Морфология и физиология

H.pylori представляют собой мелкие грамотрицательные палочки, лофотрихи, микроаэрофилы. Растут на сложных питательных средах. Продуцируют каталазу и оксидазу, которые используют для идентификации этих бактерий.

Патогенность и патогенез

К факторам вирулентности хеликобактеров относят их способность к движению и участие в проникновении в слизистую оболочку. Фермент уреаза при разрушении мочевины до аммиака и СO2 приводит к образованию газовой оболочки, защищающей от кишечного сока. Хеликобактеры продуцируют фосфолипазы, разрушающие фосфолипиды. Их токсичность связана с цитотоксином, действующим на эпителиальные клетки, токсином, нарушающим межклеточные контакты, и с ЛПС. Кроме того, на поверхности клеток образуются белки теплового шока, которые рассматривают как реакцию на стресс. Это приводит к аутоиммунному воспалению и образованию язв в желудке и двенадцатиперстной кишке. Н. pylori выделяются в 80% случаев язвенных гастритов.

Экология и эпидемиология

Является представителем нормальной микрофлоры животных. Пути передачи человеку окончательно не выяснены. По-видимому, люди заражаются алиментарным путем.

Кампилобактериозы и геликобактериозы

Инфекционные заболевания, которые вызывают бактерии рода Campylobacter, получили общее название кампилобактериозы. Они имеют острое течение, сопровождающиеся лихорадкой, поражением желудка и кишечника и с каждым годом встречаются все чаще. Среди 13 видов кампилобактерий главнейшими являются: Campylobacter jejuni, C.coli. В 1991 p. выделен отдельный вид Helicobacter pylori. Его стабильно обнаруживают у больных язвой желудка, гастрит и дуоденит. Этим заболеванием дали общее название геликобактериоза. Кроме энтеритов и энтероколитов, этих частых кампилобактериоз, значительно реже встречаются септицемии, эндокардиты, перикардиты, менингиты, поражения мочеполовой системы. У беременных женщин возможны аборты, преждевременные роды, инфицирование новорожденных во время родов. В связи с тем, что клиническая картина этих заболеваний не имеет характерных симптомов и подобная вызванных другими бактериями, лабораторные исследования приобретают важное значение. Для диагностики широко используют микроскопический, бактериологический и несколько меньше серологический методы. Материалом для исследования служит кровь, ликвор, стул или содержимое прямой кишки, взятый с помощью ректальных тампонов, плацентарная и околоплодной жидкости, содержимое абсцессов, биоптаты слизистой оболочки желудка и 12-перстной кишки. Исследуют также воду, молоко, другие продукты питания, смывы с предметов и т.п..

Бактериоскопический метод

Бактериоскопический метод используется для быстрой идентификации кампило-и геликобактерий. Тонкие мазки из фекалий и других клинических материалов фиксируют на огне, окрашивают фуксином Пфейфера течение 10-20 с и промывают водой. Поскольку для окраски других бактерий требуется 3-5 мин, то в течение 10-20 сек успевают зафарбуватись только кампилобактерии. Особенно четко их типовые формы обнаруживают при окраске кристаллическим фиолетовым. Под обычным световым микроскопом они выглядят как тонкие, спирально изогнутые бактерии, имеющие один полный завиток, С-и S-образную форму или напоминают крылья чайки. Helicobacter pylori имеет несколько большие размеры. Можно также использовать фазово-контрастную микроскопию суспензии стула в бульоне для культивирования бруцелл или жидкой среде Мюллера-Хинтон (МПБ с крахмалом и казеином). При этом выявляют не только типичные особенности морфологии кампилобактерий, но и очень характерную их подвижность.

Бактериологический метод

Оптимальные результаты получают, когда материал берут в транспортное тиогликолевой среду и в нем доставляют в лабораторию. Если посевы делают не позднее 24 ч, транспортную среду не используют. Для выделения кампило-и геликобактерий чаще применяют среду Бутцлера (до кровяного агара добавляют цефоперазон - ЗО мг / л, рифампицин - 10 мг / л и амфотерицин В - 2 мг / л). Антибиотики подавляют рост сопутствующей микрофлоры. Посевы атмосфере 10% С02пры температуре 25 ° С, 37 ° С и 42 ° С в течение 24-72 час. Кампилобактерии образуют два типа колоний: 1) правильной круглой формы с ровными краями диаметром 1-2 мм, блестящей выпуклой поверхностью, прозрачные, гомогенные, 2) неправильной округлой формы диаметром 2-8 мм, бесцветные или светло-серого цвета, прозрачные, напоминают капли воды. При посеве количественным методом рост колоний, как правило, обнаруживают на третьем и четвертом квадрантах, но нужно тщательно осматривать всю чашку, поскольку они могут вырасти только на первом квадранте в окружении колоний сопутствующей фекальной микрофлоры. Идентификация колоний кампило-и геликобактерий не вызывает трудностей для опытного бактериолога. Типичные колонии исследуют микроскопически, окрашивая препараты по Граму. В мазках возбудители имеют вид тонких, изогнутых, чаще спиралевидных клеток, могут иметь один и более витков и достигать в длину до 8 мкм. У культур, которые выращивали в течение 72 ч и дольше, клетки могут приобретать кокоподибнои "формы, что может привести к ошибкам в идентификации. Затем выделяют чистую культуру, которую идентифицируют по ряду признаков: выделение оксидазы, каталазы, уреазы, рост при температуре 25 ° С , 37 ° С и 42 ° С, гидролиз гиппурат, восстановления нитратов, чувствительность к цефалотину. Для серотипирования кампило - и геликобактерий используют реакцию агглютинации со стандартными диагностическими сыворотками и суспензией прогретых культур. Хорошие результаты типирования получены также в реакциях коаглютинации, латекс-агглютинации и непрямой гемагглютинации. Установлено 50 серотипов С. jejuni и 20 серотипов С. coli, но их количество из года в год растет. Еще более точные результаты серотипирования получены при использовании метода иммуноферментного анализа. В частности, разработана надежная тест-система для определения антигенов Н pylori в биоптатах слизистой оболочки желудка и кишечника. Серологический метод диагностики заболеваний проводят значительно реже. Он играет важную роль при массовых эпидемиологических обследованиях в ряде стран американского и африканского континентов. В Украине такие исследования пока не проводились. Для выявления антител можно использовать практически все серологические тесты. Но предпочтение отдают реакции непрямой имунофлуоресценциита метода иммуноферментного анализа. Можно применяемые в реакции обычной агглютинации, латекс-агглютинации и непрямой гемагглютинации. Имеются сообщения об использовании иммуноблоттинга и радиоиммунного метода для определения антител к C.jejuni и Н.руиоги. Они имеют исключительно высокую чувствительность, но довольно дороги и широкого потребления не приобретут.