Гемофилы Дюкрея (мягкого шанкра)
Гемофилы Дюкрея являются возбудителями венерической болезни мягкий шанкр. Открыты Дюкреем в 1889 г.
Морфология и физиология
Мелкие палочки, не образующие спор и капсул, неподвижны. В гное имеют форму коккобактерий и располагаются группами или цепочками. Растут на кровяном агаре в виде мелких сероватых изолированных колоний, окруженных небольшой зоной гемолиза. Ферментативная активность невелика.
Патогенность и патогенез
К факторам вирулентности возбудителя относятся капсула, белки наружной мембраны, гемолизины, протеазы, действующие на секреторные иммуноглобулины и белки, связывающие гемоглобин. У человека первые симптомы заболевания возникают на месте внедрения возбудителя через 3-5 дней в виде гнойного пузырька, переходящего в дальнейшем в язву (одну или несколько) с подрытым краем и гнойным отделяемым. Язва с мягкими краями и дном, болезненна и достигает величины 1-1,5 см. Располагаются язвы на половых органах и могут сопровождаться лимфаденитами. Через 1-2 мес. язвы зарубцовываются, но болезнь иногда протекает длительно. Иммунитет перенесенное заболевание не оставляет. Со 2-й недели болезни появляются аллергические реакции.
Экология и эпидемиология
Антропонозная инфекция. Возбудитель передается половым путем. В РФ в настоящее время регистрируется редко. Лабораторная диагностика основывается главным образом на бактериоскопическом исследовании содержимого язв, которое одновременно исследуют и на наличие бледной трепонемы. Бактериологический метод при диагностике мягкого шанкра применяется редко ввиду его сложности и ненадежности. С 8-го дня болезни можно проводить аллергическую пробу.
Мягкий шанкр
Мягкий шанкр (шанкроид) - венерическая болезнь, вызываемая Haemophilus ducreyi, характеризующееся образованием на половых органах болезненной язвы с мягким дном, подрытыми краями и желтоватым сальным содержанием. В ряде случаев образуются несколько язв, которые сливаются между собой. Часто развивается и региональный лимфаденит. В последнее время количество заболеваний мягкий шанкр растет.
Лабораторная диагностика не вызывает каких-либо трудностей. Она включает несколько этапов: 1) бактериоскопию мазков из глубоких слоев язвы или пунктатов лимфатических узлов 2) выделение чистых культур на тех же средах, на которых культивируют H.influenzae (кровяной, шоколадный агар, среду Левинталя и др..) 3) постановку аллергической пробы.
Микроскопия мазков
Для изготовления препаратов - мазков материал берут ложечкой Фолькмана из-под нависших краев язвы после ее тщательной очистки ватным тампоном, смоченным физиологическим раствором хлорида натрия. Во время забора пытаются схватить кусочки (клочья) тканей. Именно в таком материале возбудителя обнаруживают чаще всего. Одновременно проводят микроскопическое исследование на выявление возбудителя сифилиса в темном поле зрения. Мазки фиксируют в смеси Никифорова и окрашивают по Граму, фуксином Циля или метиленовым синим. Под микроскопом Н. ducreyi выглядит овоидные палочек, расположенных параллельными цепочками ("железнодорожные пути") или парами или группами. Они не имеют спор и капсул, часто интенсивнее окрашиваются на полюсах.
Бактериологическое исследование
Бактериологическое исследование проводят реже. Патологический материал обрабатывают ванкомицином (3 мкг / мл), что значительно повышает частоту выделения возбудителя. Посевы выращивают при 35 ° С в атмосфере 8-10% С02. На плотных кровяных средах через 24-48 ч палочки Дюкрея вырастают в виде мелких (1-2 мм) шарообразных блестящих колоний, напоминающие рост стрептококков. В типичных случаях колонии окрашены в желтовато-серый цвет, окруженные небольшой зоной гемолиза, которая лучше проявляется позже. В жидких средах палочки Дюкрея растут в виде рыхлых хлопьев или зерен на стенках пробирок, свободно плавающих в бульоне. В мазках из чистых культур или отдельных колоний бактерии расположены хаотично, без образования длинных цепочек. Выделенные культуры идентифицируют по биохимическим и антигенным свойствам. Палочки Дюкрея ферментируют глюкозу, лактозу, маннит, сахарозу, не имеют протеолитических свойств. Надежной является серологическая идентификация в реакции агглютинации на стекле с соответствующей диагностической сывороткой. При определении потребностей X-и Y-факторов для роста культур важно помнить, что Н. ducreyi требует лишь фактора X (а не Y). Этот тест используется для дифференциации возбудителя мягкого шанкра от Н. influenzae. В связи с отсутствием иммунитета после перенесения болезни, серологические реакции для диагностики мягкого шанкра не используют, хотя в организме появляются Комплементсвязывающие антитела, но в малых титрах и не у всех больных.
Аллергическая проба
Аллергическую пробу с антигеном из бактерий мягкого шанкра проводят, начиная с 8-го дня. Внутрикожно вводят 0,1 мл аллергена или вакцины / /, ducreyi. Учет результатов проводят через 24-48 часов. Она оказывается положительной в 90-98% случаев.