Боррелии эпидемического возвратного тифа
Род Borrelia включает около 20 видов, из которых для человека патогенны только два: возбудитель эпидемического (вшивого) возвратного тифа В. recurrentis и эндемического (клещевого) возвратного тифа - В. duttoni, В. burgdorferi и др. Боррелии эпидемического возвратного тифа Открыты в 1868 г. О. Обермеиером.
Морфология и физиология
Боррелий имеют форму тонкой спирали с тремя крупными завитками с заостренным концом (рис. 20.53 на цв. вкладке). Они окрашиваются краской Романовского-Гимза с сине-фиолетовый цвет, грамотрицательны. Боррелий - строгие анаэробы. Их культивируют на питательных средах, с животными белками (сыворотка крови, асцитическая жидкость, кусочки паренхиматозных органов или свернутый яичный белок). Хорошо размножаются в куриных эмбрионах.
Антигены
Поверхностные антигены чрезвычайно вариабельны вследствие внутригеномных рекомбинаций. Поэтому серологическая идентификация боррелий не может иметь практического значения.
Патогенность и патогенез
Видимо, в инвазии боррелий участвует белок наружной мембраны. После проникновения в клетки лимфомакрофагальной системы боррелий размножаются в них, а затем поступают в кровяное русло. Компоненты клеточной стенки, которые освобождаются при лизисе боррелий, оказывают токсическое действие по типу эндотоксина. Поступление боррелий в кровь является причиной первого лихорадочного приступа. В крови больного в этот период накапливаются спирохетолизины, которые лизируют боррелий с освобождением эндотоксина. При этом часть боррелий с измененной антигенной структурой сохраняется и дает новую генерацию, нечувствительную к образовавшимся антителам. При повторном поступлении возбудителя в кровь начинается второй приступ. Одновременно образуются спирохетолизины, растворяющие вторую генерацию боррелий. Такие приступы болезни повторяются 5-6 раз, вызываемые новыми генерациями боррелий с измененной антигенной структурой. Эти приступы повторяются до прекращения поступления в кровь генераций боррелий с измененной антигенной специфичностью, после чего наступает выздоровление больного. В капиллярах внутренних органов под влиянием антител могут образоваться аггрегаты боррелий и тромбоцитов, в результате чего нарушается местное кровообращение с развитием геморрагических инфарктов.
Иммунитет
При возвратном тифе наблюдается гуморальный иммунный ответ. Постинфекционный иммунитет нестойкий. Регистрируются случаи повторных инфекций. Экология и эпидемиология. Резервуаром инфекции в природе является больной человек. Переносчик - платяная вошь. Боррелий вместе с кровью попадают в кишечник вши и размножаются в гемолимфе. Заражение человека возможно только при втирании гемолимфы при расчесах. Для вшей боррелий непатогенны и сохраняются в течение всей жизни насекомого. Трансвариально не передаются.
Возвратный тиф (эпидемический, вшивый)
Возвратный тиф (эпидемический, вшивый) - острая трансмиссивная рецидивирующая инфекционная болезнь, которую вызывает Borrelia recurrent is, характеризующееся общей интоксикацией, поворотной лихорадкой, поражением печени, селезенки, мозговых оболочек и других органов. При высокой вшивости среди населения может иметь эпидемическое распространение. Переносчиком болезни являются вши: Pediculus vestimenti, P. capitis. Основной метод лабораторной диагностики возвратного тифа - микроскопическое исследование крови больного в препарате толстой капли и обычном мазке. Для дифференциации вшивого и клещевого поворотных тифов используют биологическую пробу на гвинейских свинках.
Бактериоскопическое исследование
У больного берут кровь из пальца во время нападения лихорадки до начала или в перерыве антибиотикотерапии, изготавливают препарат толстой капли и мазок. В период ремиссии можно брать для исследования костный мозг. Высушенную толстую каплю не фиксируют, а непосредственно окрашивают по методу Романовского-Гимза. Можно красить метиленовым синим или фуксином. На толстую каплю наносят краситель Романовского сначала на 5 мин для того, чтобы прошел гемолиз, потом его заменяют на свежий и выдерживают еще 40 мин. Препарат осторожно промывают водой, высушивают и микроскопируют под иммерсионным объективом. Борелии возвратного тифа окрашиваются в сине-фиолетовый цвет и имеют вид тонких длинных нитей с 3-5-ю неравномерными завитками и заостренными концами, расположенных внеклеточно. Величина их в несколько раз превышает диаметр лейкоцитов. Если в толстой капле находятся большие скопления боррелий, их трудно отличить от нитей фибрина. В таких случаях окрашивают обычный мазок крови, перед этим обязательно фиксируют этанолом или смесью Никифорова. При микроскопии мазка достаточно четко видно боррелии с их характерными неравномерными вторичными завитками. Если в толстой капле боррелии не обнаружены, мазок не исследуют. Возбудитель возвратного тифа легко обнаруживают с помощью метода висячей капли в темном поле зрения, где боррелии распознают по их беспорядочным движением. Можно изготавливать из крови и тушевых препараты по Бурри, при микроскопировании которых боррелии выглядят как серебристые нити на темном поле. В период апирексии с помощью микроскопических методов выявить боррелии не удается. В таких случаях употребляют метод обогащения. У больного берут 8-10 мл крови, отримуюють сыворотку, которую центрифугируют в течение 60 мин при 3-4-х тыс. об / мин. Из осадка производится надавленные каплю, которую исследуют в темном поле. Из осадка можно изготавливать мазки, которые окрашивают по Романовскому-Гимзе или фуксином Пфейфера.
Бактериологическое исследование
Культуры боррелий можно выделить от больного путем посева исследуемого материала на жидкие питательные среды с кровью, сывороткой, кусочками тканей и выращивания в анаэробных условиях при температуре 28-30 ° С. Еще лучше удается вырастить их на хорионалантоисний оболочке куриных эмбрионов или путем заражения платяной вшей. Однако выделение культур боррелий на питательных средах малоэффективно. Практические лаборатории этими методами не пользуются.
Биологический метод
Как дополнительный метод диагностики эпидемического возвратного тифа применяют заражения кровью больных молодых белых крыс или белых мышей. Последним вводят 0,5 мл крови внутрибрюшинно, а белым крысам - 3-5 мл. Через 2-4 дня у зараженных животных исследуют кровь хвостовых вен, где боррелии проявляют микроскопическим методом. Гвинейские свинки нечувствительны к В. recurrentis, но чувствительны к возбудителям клещевых боррелий.
Серологическое исследование
Поворотный эпидемический боррелиоз сопровождается нарастанием антител в высоких титрах, но в связи с постоянным изменением специфичности поверхностных антигенов с каждым следующим лихорадочным приступом серологические реакции не получили широкого применения. Иногда использовали иммунологическую реакцию Рикенберга-Брусин. Это реакция нагрузки боррелий тромбоцитами. Сыворотку крови больного смешивали с цитратной плазмы крови гвинейских свинок в одинаковых объемах. К этой смеси добавляли культуру боррелий, тщательно перемешивали, инкубировали 15 мин в термостате, а затем изготавливали препарат "надавленные капли" и исследовали в темном поле зрения с иммерсионным объективом. В присутствии специфических антител тромбоциты гвинейской свинки облепляли тела боррелий и последние переставали двигаться. Следовательно, выявление боррелий методом толстой капли и обычных мазков крови в период приступа лихорадки является быстрым и решающим методом лабораторной диагностики эпидемического возвратного тифа.