Актиномицеты
Актиномицеты (myces - гриб, actis - луч) относят к группе грамположительных неспорообразующих бактерий неправильной формы. К этой же группе относят нокардиоформные актиномицеты (нокардии). Отдельные виды рода Actinomyces (A. israelii, A. naeslundii, A. bovis и др.) являются представителями нормальной микрофлоры организма человека или животных, которые в определенных условиях вызывают актиномикозы.
Морфология и физиология
Тонкие прямые или слегка изогнутые палочки и нити с настоящим ветвлением. Короткие палочки часто с булавовидными концами, напоминающие коринебактерии. Типичны разветвленные палочки с ветвящимися нитями на концах. Грамположительные, неподвижные, неспорообразующие, некислотоустойчивые. Конидий не образуют в отличие от грибов. Факультативные анаэробы, нуждаются в дополнительном снабжении СО2 Хемоорганотрофы с бродильным типом метаболизма. При сбраживании углеводов образуют кислоту. На плотных средах через 24 ч формируют характерные для отдельных видов микроколонии, а через 7-14 дней - макроколонии. Ферментируют глюкозу с образованием кислоты, обладают слабой протеолитической активностью.
Антигены
В составе клеточных стенок содержатся неидентичные видоспецифические антигены, что дает возможность разделить их на 5 серогрупп. A. israelii относится к серогруппе D, A. naeslun-dii - к серогруппе A, A. bovis - к серогруппе D. Каждая серогруппа подразделена на серовары.
Патогенность и патогенез
Факторы вирулентности и токсины актиномицетов, встречающихся в патологии человека и животных, изучены недостаточно. Возбудитель локализуется на эпителиальных клетках слизистой оболочки полости рта и других полостей и органов, а также клетках кожи, где образуются воспалительные очаги - актиномикомы - в случае иммунодефицитных состояний. В актиномикомах обнаруживаются друзы актиномицетов. Из первичного очага возбудитель распространяется в организме либо контактным, либо лимфогенным путем. Бактериемия отсутствует. Вторичные очаги инфекции могут образоваться в разных органах (легкие, печень и др.). К основному заболеванию часто присоединяется вторичная бактериальная инфекция.
Иммунитет
Постинфекционный иммунитет характеризуется слабой напряженностью. В сыворотке крови обнаруживаются противомикробные антитела, которые не обладают протективными свойствами. Отмечается формирование ГЗТ.
Экология и эпидемиология
Актиномикоз относится к антропонозным инфекциям. Однако актиномицеты, поражающие многих животных (крупный и мелкий рогатый скот, свиньи и др.), в частности, A.bovis, по мнению некоторых авторов, могут вызывать заболевание у людей. Полагают, что болезнь возникает эндогенным путем, поскольку A.israelii обнаруживается в полости рта здоровых людей. Экзогенная инфекция также имеет место при заражении людей аэрозольным путем из внешней среды. Показано, что актиномицеты не только сохраняют свою жизнеспособность, но и размножаются в окружающей среде.
Актиномикоз
Актиномикоз - хроническое гранулематозное гнойное воспаление различных тканей и органов, вызываемое актиномицетами. Оно сопровождается инфильтрацией тканей, абсцессами, свищами, образованием плотных зерен (друз). Основные возбудители - Actinomyces israelii и A. bovis. Материалом для лабораторной диагностики служит навоз, мокрота, моча, испражнения, спинномозговая жидкость, пунктаты и биоптаты пораженных тканей. Наилучшие результаты дают микроскопические и бактериологические методы исследования.
Бактериоскопия
Бактериоскопию проводят для выявления друз. Для этого в тонком слое жидкого или разреженного материала в чашке Петри отбирают под лупой гнойные кусочки или зерна, переносят их на предметное стекло в каплю 10-20% раствора NaOH, немного подогревают, накрывают покровным стеклом и исследуют под микроскопом (х40). Друзы выглядят как повстяноподибни скопления мицелия, от которых на периферию радиально (подобно лучам солнца) отходят гифы с утолщениями на концах. Микроскопически исследуют и окрашенные препараты друз. С этой целью зерна или гнойные кусочки промывают водой, помещают на предметное стекло, покрывают вторым стеклом, осторожно нажимают, разнимают, получая два равномерных мазки. Окрашивают их по Граму и Цилю-Нильсену. При иммерсионной микроскопии обнаруживают клетки мицелия, палочковидные и коккообразные образования, а также споры. По Граму споры окрашиваются в темно-фиолетовый, а друзы - в розовый цвет. При окраске по Цилю-Нильсену мицелий имеет синий, а споры розовый цвет. Если друзы не проявляют, из исследуемого материала готовят обычные мазки и окрашивают их по Граму. При этом под микроскопом обнаруживают пучки мицелия или отдельные нити фиолетового цвета. Выявление друз или тонкого несептованого мицелия и спор подтверждает диагноз актиномикоза.
Бактериологическое исследование
Патологический материал от больных, как правило, загрязнен посторонней микрофлорой. Для избавления от нее материал центрифугируют в растворе пенициллина и стрептомицина, затем отмывают от антибиотиков 0,85% раствором NaCl. Для освобождения от сопутствующей флоры можно внести в пробирку 50% раствор глицерина и выдержать 2-3 суток при 37 ° С. Обработанный таким способом материал высевают на среду Сабуро, кровяной или сывороточный агар. Посевы инкубируют при 37 ° С в течение 3-5 дней. A. israelii на сывороточном агаре образует бесцветные пастообразные бугристые колонии. Воздушный мицелий образуется слабо. В мазках из колоний видно палочки, шаровидные и колбоподибни элементы. Старые колонии становятся пушистыми, словно припорошенные мукой. A. bovis растет в анаэробных условиях, образуя бесцветные пастообразные колонии, рано покрываются белым воздушным мицелием. Колонии прочно спаиваются с агаром и не снимаются петлей. В мазках из колоний видно несептований мицелий, распадающийся на палочковидные и коккообразные образования. Идентификацию выделенных культур проводят по ряду признаков. Оба вида не звуджують молоко, не разжижают желатин, не восстанавливают нитраты.
Серологическая диагностика
Серологическая диагностика проводится редко. Используют реакции связывания комплемента и непрямой гемагглютинации. Антигеном служит актинолизат. Но обе реакции могут давать положительные результаты и при других заболеваниях (рак легких, тяжелые гнойные процессы). Несколько большее диагностическое значение имеют иммунологические тесты: реакция торможения миграции лейкоцитов и аллергическая проба с актинолизатом, а также количественное определение иммунокомпетентных клеток. Внутрикожная проба при висцеральном актиномикозе часто бывает отрицательный.