В ходе микроскопического исследования производят подсчет и исследование клеток красного костного мозга в предварительно окрашенных и зафиксированных мазках. Помимо микроскопа, для проведения анализа требуется специальная камера Горяева, в которой и происходит подсчет числа миелокариоцитов (имеющих ядра клеток-предшественников форменных элементов крови) в 5 или 100 больших квадратах.
При исследовании мазков красного костного мозга число миелокариоцитов определяют двумя способами.
Количество миелокариоцитов считается соответствующим норме, если при просмотре препарата красного костного мозга под микроскопом в каждом поле зрения наблюдается 15-25 клеток. При меньшем их количестве костный мозг оценивается как гипоклеточный, а если миелокариоцитов более 25, то как гиперклеточный.
Для подсчета мегакариоцитов (самых больших ядерных клеток красного костного мозга, образующих тромбоциты) также используют камеру Горяева. Число гигантских клеток рассчитывают по формуле.
В норме количество мегакариоцитов составляет (50,0 - 150,0) х 106 в 1 л.
При микроскопическом изучении мазка красного костного мозга наличие в поле зрения более 2-3 гигантских клеток считается нормальным.
Результат подсчета процентного соотношения форменных элементов красного костного мозга получил название миелограммы. После ее составления проводят морфологическую оценку отдельных элементов красного костного мозга. Следует помнить, что заключение ставят при непременном сопоставлении миелограммы с результатами гемограммы (общего анализа крови).
Нормальные показатели миелограммы представлены в таблице.
Нормальные показатели миелограммы
| Параметр | Показатель нормы | |||||
| У взрослых | У новорожденных | Возраст 3 года | Возраст 5-6 лет | |||
| Количество миелокариоцитов, X 109/л |
41,6- 195,0 | 146,5- 222,5 | 170,8- 296,8 | 100,4- 300,0 | ||
| Количество мегакариоцитов, X 106/л |
50,0- 150,0 | 51,8- 108,2 | 53,8- 113,8 | 52,8- 157,2 | ||
| Бластные клетки, % | 0,1-1,1 | 0,7-2,1 | 1,3-2,7 | 0-1,2 | ||
| Миелобласты, % | 0,2-1,7 | 0,8-1,8 | 0,8-3,3 | 1,5-3,6 | ||
| Не йт ро фи ль ные кл ет ки % |
Не зр ел ые |
Промиелоциты | 1,0-4,1 | 4,2-6,2 | 2,8-5,8 | 1,2-3,8 |
| Миелоциты | 7,0- 12,2 | 8,1- 12,3 | 8,5- 11,9 | 4,2-8,7 | ||
| Метамиелоциты | 8,0- 15,0 | 6,8-8,8 | 7,1-9,0 | 6,5- 10,3 | ||
| Зр ел ые |
Палочкоядерные | 12,8- 23,7 | 20,0- 25,2 | 14,0- 25,4 | 13,2- 24,0 | |
| Сегментоядерные | 13,1- 24,1 | 18,0- 23,6 | 13,3- 22,5 | 8,3- 13,9 | ||
| Все нейтрофильные клетки, % | 52,7- 68,9 | 43,0- 54,7 | ||||
| Эозинофилы всех генераций, % | 0,5-5,8 | 2,7-5,3 | 2,8-6,8 | 2,4-7,4 | ||
| Базофилы, % | 0-0,5 | 0-0,3 | 0-0,1 | 0,2-0,8 | ||
| Лимфоциты, % | 4,3- 13,7 | 2,0-3,8 | 6,7- 14,6 | 18,7- 29,5 | ||
| Моноциты, % | 0,7-3,1 | 0-0,1 | 0-0,2 | 1,8-5,5 | ||
| Плазматические клетки, % | 0,1-1,8 | 0,1-0,1 | 0-0,3 | 0-0,5 | ||
| Эритробласты, % | 0,2-1,1 | 1,0-1,8 | 0,8-2,0 | 0,3-1,0 | ||
| Пронормобласты, % | 0,1-1,2 | |||||
| Нормо- бласты % |
Базофильные | 1,4-4,6 | 2,5-5,1 | 1,4-3,4 | 1,2-2,4 | |
| Полихроматофильные | 8,9- 16,9 | 6,9- 10,6 | 7,5- 11,2 | 7,8- 16,0 | ||
| Оксифильные | 0,8-5,6 | 5,9- 10,0 | 5,5-7,3 | 0,1-1,9 | ||
| Все эритроидные клетки (эритрока- риоциты), % |
14,5- 26,5 | 11,3- 19,4 | ||||
| Ретикулярные клетки | 0,1-1,6 | 0,6-1,9 | 0,1-1,4 | 0,2-1,2 | ||
| Лейкоэритробластное отношение | 2,1-4,5 | |||||
| Индекс созревания эритрокариоцитов | 0,8-0,9 | |||||
| Индекс созревания нейтрофилов | 0,5-0,9 | |||||
В описании миелограммы врач обязан отметить морфологические признаки патологически измененных клеток (размер, форму клеток и ядер, соотношение объема ядра и цитоплазмы, характер хроматина, наличие нуклеол, цвет и зернистость цитоплазмы и т.п.), а также наличие качественных и количественных особенностей отдельных ростков органа кроветворения.
Анализ миелограммы осуществляется согласно определенной схеме, представленной в таблице 8.
Анализ миелограммы
| Параметр | Описание |
| Клеточность исследуемого материала(красного костного мозга) | нормальная |
| сниженная | |
| повышенная | |
| Состав пунктата по морфологическим характеристикам клеток (размер, форма клеток и ядер, соотношение ядра и цитоплазмы, характер хроматина, наличие нуклеол, цвет и зернистость цитоплазмы) | полиморфный (различный) |
| мономорфный (однообразный) | |
| значительно разведен периферической кровью | |
| Бласты | Количество и морфологическая характеристика |
| Гранулоцитарный росток | сохранен |
| сужен (редуцирован) | |
| расширен | |
| морфологическая характеристика клеток | |
| Созревание нейтрофилов | не нарушено |
| задержано | |
| ускорено | |
| Другие лейкоцитарные ростки | Количество и морфологическая характеристика клеток гиперплазирован- ного ростка |
| Эритроидный росток | сохранен |
| сужен (редуцирован) | |
| расширен | |
| морфологическая характеристика клеток | |
| Тип эритропоэза | нормобластный |
| мегалобластный | |
| Гемоглобинизация эритроцитов | не нарушена |
| ускорена | |
| задержана: на полихроматофиль- ных эритроцитах; на базофильных эри троцитах |
|
| Параметр | Описание |
| Мегакариоциты | Количество и морфологическая характеристика клеток |
| Клетки злокачественного новообразования (эпителиальной природы) | обнаружены |
| не обнаружены |
Существуют индексы, позволяющие охарактеризовать кроветворение в красном костном мозге.
К их числу относят:
1) индекс созревания нейтрофилов;
2) лейкоэритробластное отношение;
3) индекс созревания эритрокариоцитов;
4) парциальная эритронормобластограмма.
Индекс созревания нейтрофилов (ИСН). Отражает соотношение незрелых и зрелых нейтрофилов костного мозга и рассчитывается по формуле:
ИСН = (ПроМц + Мц + МетаМц) : (П/Я + С/Я),
где ПроМц - промиелоциты;
Мц - миелоциты;
МетаМц - метамиелоциты;
П/Я - палочкоядерные нейтрофильные лейкоциты;
С/Я - сегментоядерные нейтрофильные лейкоциты.
В норме ИСН составляет 0,5-0,9. Повышение индекса созревания нейтрофилов при нормальной или повышенной клеточности пунктата расценивается как гиперплазия клеток белого ростка костного мозга (лейкопоэза). При пониженной клеточности пунктата может иметь место сужение эритроидного ростка красного костного мозга или значительная примесь периферической крови.
Снижение индекса созревания нейтрофилов при высокой клеточности пунктата является признаком разрастания клеток красного ряда; при пониженной клеточности пунктата - признаком угнетения процесса образования белых клеток, т. е. сужения белого ростка костного мозга (лейкопоэза).
Лейкоэритробластное соотношение (Л/Э). Определяет соотношение всех клеток (гранулоцитарных, моноцитарных и лимфоидных) белого ростка костного мозга к ядросодержащим клеткам эритроидного ряда.
В норме лейкоэритробластное соотношение равно 2,1-4,5.
Индекс созревания эритрокариоцитов (ИСЭ). Отражает соотношение гемоглобинизированных эритрокариоцитов и всех клеток эритроидного ряда: ИСЭ = (полихроматофильные нормобласты + оксифильные нормобласты): общее количество эритрокариоцитов.
Нормальные значения ИСЭ составляют 0,8-0,9.
Парциальная эритронормобластограмма. Определяет соотношение базофильных (эритробласты + базофильные нормобласты), полихроматофильных и оксифильных форм эритрокариоцитов.
Нормальное соотношение эритрокариоцитов : (базофильные клетки) : (полихроматофильные клетки) : (оксифильные клетки) = 1 : (2 :4) : (1,5 : 2).