Амебиаз

Амебиаз (син.: амебная дизентерия) - протозойная инфекционная болезнь, характеризующаяся язвенным поражением толстого кишечника, склонностью к рецидивирующему течению и внекишечных осложнениями (абсцессы легких, печени, головного мозга). Возбудитель заболевания - Entamoeba histolytica - относится к классу саркодовых. В организме человека патогенная амеба может существовать в 4-х формах: 1. Большая вегетативная или тканевая форма (forma magna) имеет размер 30-60 мкм, быстро передвигается псевдоподий и способна фагоцитировать эритроциты. Она имеет круглое ядро, в свежих нативных препаратах видимое только при фазово-контрастной микроскопии. Способность фагоцитировать является характерным признаком, что позволяет отличить ее от других видов амеб кишечника. 2. Малая вегетативная или просветные формы (forma minuta) имеет размер 15-25 мкм, которая фагоцитируют бактерии и грибы и не пожирает эритроциты. 3. Вегетативная предцистна форма (forma praecystica) имеет Ромир 10-20 мкм. Включение (микроорганизмы, эритроциты) в цитоплазме отсутствуют. 4. Цистный форма (forma cystica) имеет правильную шаровидную форму, размером 8-15 мкм, не содержит бактерий и других пищевых включений. Основным источником инфекции являются больные острой и хронической форме амебиаза, реконвалесценты и носители. Выделение цист может продолжаться годами. Один человек может ежесуточно выделять около 500 млн цист. Механизм заражения - фекально-оральный, цисты попадают в организм здорового человека с питьевой некипяченой водой, пищевыми продуктами, через грязные руки и предметы обихода. Для лабораторной диагностики амебиаза используют микроскопические, культуральные, биологические и серологические исследования. Материалом для микробиологического анализа служат испражнения, аспирантов и биоптаты, полученные при колонофиброскопия и ректороманоскопии, мокрота, гной из пораженных органов, кровь для серологических реакций. При пересылке стула в лаборатории, в качестве консерванта используют поливиниловый спирт.

Микроскопическое исследование

Решающим в диагностике амебиаза являются данные паразитологических исследований. Большие тканевые формы с эритроцитами является патогномоничным признаком гистолитических амебы. Очень важным является также нахождение характерных четырехъядерных цист. Микроскопируют 5-6 препаратов "надавленные капли" с свижовидиленого кала (не позднее 10 минут после опорожнения), а также мазки, окрашенные раствором Люголя, смесью Сафарлиева или железным гематоксилином по Гейденгайном. В нативных препаратах тканевая форма дизентерийной амебы имеет вид крупных клеток, активно двигаются. Эндоплазма и эктоплазма резко отличаются. Эндоплазма темнее, зернистая, в ней расположены вакуоли с фагоцитированными эритроцитами или без них и мало заметное ядро, которое лучше выявляется фазово-контрастным микроскопом. Эктоплазма более светлая и прозрачная, неравномерной толщины. Малая просветные формы меньших размеров имеет такой же вид, но без фагоиитованих эритроцитов. Иногда в цитоплазме можно обнаружить небольшое количество бактерий и грибов. Это основная форма существования гистолитических амебы, которую проявляют при хроническом амебиазе или у реконвалесцентов. При остром течении болезни и у носителей ее не находят. Цисты в нативных препаратах имеют вид блестящих светопреломляющая шариков, размером 8-15 мкм, их внутреннее содержание мало заметен. При использовании консерванта Сафарлиева цитоплазма дизентерийной амебы окрашивается в голубой цвет, ядро - в интенсивно-синий, пищевые и гликогена вакуоли остаются бесцветными. Этот метод позволяет отличить Е. histolytica от Entamoeba colif в которой кариолема расположена эксцентрично, а глыбки хроматина разные по величине. В мазках, окрашенных по Гейденгайном, большие тканевые формы гистолитических амебы отчетливо видимые на фоне многих эритроцитов, единичных лейкоцитов и бактерий. Цитоплазма амебы имеет четкое разделение на свету гомогенную бесцветную эктоплазмы и темную мелкозернистую ендоплазму темно-серого цвета, в которой видны окрашенные в черный цвет эритроциты. Они имеют различную величину и форму в зависимости от степени их переваривания. В эндоплазма амебы видно ядро размером 3-5 мкм с тонкой оболочкой, под которой находятся мелкие зерна периферийного хроматина. Центр ядра занимает пятиконечная кариосома, также окрашена в черный цвет. В мазках могут встречаться дегенеративно измененные амебы, в которых видна интенсивная вакуолизацию цитоплазмы и пикноз ядра. Цисты дизентерийной амебы имеют правильную круглую форму, реже - овальную, с гладкой двухконтурной оболочкой. В цитоплазме цист зрелого возраста видно 4 ядра, в незрелых - 1-2 ядра. Под оболочкой ядер находятся серповидные зерна хроматина, в центре - кариосома. В незрелых цист можно обнаружить вакуоли, содержащие гликоген. При окраске раствором Люголя большие тканевые и образовательные формы имеют типичную морфологическую структуру, но теряют подвижность. Цисты имеют форму колец с пятиконечной кариосома в центре. Незрелые цисты имеют каплю гликогена окрашивается в красный цвет. Методика микроскопического исследования слизи, гноя, биоптатов, мокрота такая же, как и при микроскопии испражнений, но положительные результаты получить трудно.

Культуральные и биологические исследования

Если проявить гистолитических амебы при микроскопии нативных и окрашенных препаратов не удается, делают посевы исследуемого материала на среду Робинзона или Павловой, в состав которых входит печеночный экстракт, выделяют и идентифицируют чистые культуры. Но такой паразитологический метод практические лаборатории используют очень редко. В некоторых случаях можно применять постановку биологической пробы. Исследуемым материалом заражают котят, хомячков и других лабораторных животных. Так, при введении стула больных, содержащие дизентерийной амебы, в прямую кишку котят, у них развивается геморрагический колит. В фекалиях зараженных животных возбудителя легко обнаружить при микроскопии нативных препаратов. Серологические исследования при амебиазе также проводят редко, в основном для диагностики его внекишечных форм. При этом используют реакции непрямой гемагглютинации с антигеном из разрушенных ультразвуком дизентерийных амеб, латекс-агглютинации, связывания комплемента, непрямой иммунофлуоресценции, встречного имуноелекрофорезу и метод ИФА. Серологические реакции выпадают положительными в 60-70% больных кишечный амебиаз и в 90-95% - при амебный абсцесс печени, легких или головного мозга.